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2024-04-19 13:55:15
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实验介绍
【技术原理】
1、CFSE（CFDA-SE） 是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。CFDA-SE是一种带有琥珀酰亚胺(NHS)的荧光染料，可以结合细胞内的蛋白质。CFDASE在结构上将酚羟基部位改造成AM体，所以自身不发荧光，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，进入细胞内的CFDA-SE的AM 部位能被细胞内酯酶水解生成CFSE，通过共价结合赖氨酸侧链的氨基而掺入细胞内和细胞表面的蛋白，且结合后发出强的绿色荧光。细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半。CFSE的琥珀酰亚胺(NHS)和细胞内蛋白质的氨基部位结合，固定在细胞内，不会漏出细胞外。CFSE进入细胞后定位于细胞膜、细胞质和细胞核，在细胞核的荧光最强。
2、BrdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物。它也能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子，通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性，通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。
【实验流程】
CFSE：加入CFSE-孵育-洗涤-培养-上机
BrdU：加入BrdU-孵育-洗涤-培养-上机
案例展示
送检与交付标准
| 样品类型 | 样品需求 | 运输条件 |
|---|---|---|
| 组织 | 离体后组织制成单细胞悬液，加入PBS培养基内 | 常温运输 |
| 活细胞 | 样本量：1*106个细胞/TEST，加入PBS培养基内 | 常温运输 |
| 血液 | 将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内 | 常温运输 |
电话：400-691-6686
在线时间：8:00-24:00
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