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甲苯胺蓝染色

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实验介绍

        【实验介绍】

        甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。

        

        【实验步骤】

        Step1: 石蜡切片常规操作脱蜡水化。

        Step2: 甲苯胺蓝染色2-10 min

        Step3: 自来水冲洗2min

        Step4: 脱水:依次经85%95%Ⅰ、95%Ⅱ各10秒,无水乙醇Ⅰ30s、无水乙醇Ⅱ1min

        Step5: 透明:经二甲苯1min、二甲苯Ⅱ2min

        Step6: 中性树胶固封,镜检。

        

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结果分析:

1. 染色清晰,组织结构层次分明。

2. 木质化细胞壁呈蓝绿色,纤维素细胞壁呈紫蓝色。



技术总结

【常见问题】


1.染色时间过长或过短导致的染色过深或过浅。

2.植物组织较脆,易出现掉片。


【注意事项】


1.控制染色时间,保证染色不至于过深或过浅,必要时可在显微镜下观察控制染色时间。

2.水洗时间不易过长,保证阳性显色清晰可见。

3.植物组织切片时应控制切片厚度以及摊片时间,减少掉片风险。



送检与交付标准

【交付标准】


1. 实验报告 

2. 真实实验结果

3. 原始图片

4. 实验原始数据

5. 剩余物料在周期内可返还(超过周期,不予返还)

【送检流程】

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