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支原体检测(细胞上清污染)-1
支原体检测(细胞上清污染)-1

支原体检测(细胞上清污染)

支原体是细胞外生存的最小微生物,是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。通过对支原体特定的序列设计引物,当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增,会将目标DNA特异性地复制,然后通过琼脂糖电泳检测,会跑出条带出现阳性结果。反之当没有支原体污染时,由于没有模板,PCR无法扩增,则琼脂糖电泳跑不出条带,出现阴性结果

  • 支原体
  • 原核微生物
  • PCR 扩增
  • 污染检测

案例展示

实验介绍

应用简介

原核生物的rRNA碱基序列非常保守,而rRNA操纵子上编码rRNADNA间隔区如16S23S间隔区,各种生物种间的碱基序列差别很大。这个间隔区的 DNA序列及长度在 Mycoplasma 各个种间既有相对保守的部分,也有具有很大差异的部分。本制品是在编码 16S 23S rRNA DNA 上设计一对 F1/R1 引物,扩增编码 16S 23S rRNA DNA 间隔区。此反应体系只特异性扩增 Mycoplasma DNA,检出灵敏度与特异性都很高。

技术原理

通过对支原体特定的序列设计引物,当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增,会将目标DNA特异性地复制,然后通过琼脂糖电泳检测,会跑出条带出现阳性结果。反之当没有支原体污染时,由于没有模板,PCR无法扩增,则琼脂糖电泳跑不出条带,出现阴性结果。

【技术总结】

1待检样本取样:

一般是接种后进行 3-6d细胞培养的培养上清液;

如果使用 Eagle 等常用的细胞培养基时,培养上清可直接加入到 PCR 反应液中;

如果使用细胞悬浊液作为样品,则需要提取 DNA,再进行 PCR 反应。    

2、一定要设置阳性对照(一般采用带有支原体特异片段的质粒)与阴性对照(H2O);

3、配制PCR反应体系时需在超净工作台里进行,避免污染。 

交付标准

1实验报告

2真实实验结果

3原始图片

4实验原始数据

5剩余物料在周期内可返还(超过周期,不予返还)

咨询记录

城市 咨询内容 时间
北京市 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 12:53:00
上海市 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 11:47:00
山东省泰安市新泰市 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 10:22:00
国外 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 08:05:00
江苏省盐城市盐都区 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 08:05:00
河北省张家口市怀来县 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 07:56:00
广西壮族自治区崇左市扶绥县 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 06:02:00
VirginiaLoudoun 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-07 04:06:00
Kisii 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-06 23:56:00
广东省广州市 咨询支原体检测(细胞上清污染)服务相关 2026-06-06 20:40:00