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电镜检测

超微病理是运用电子显微镜高分辨力,看清原来在光学显微镜下看不清或看不到的细胞膜、细胞质内的各种细胞器和细胞核的细微结构及其病理变化,并对其进行研究的技术。

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实验介绍

【技术原理】

超微病理是运用电子显微镜高分辨力,看清原来在光学显微镜下看不清或看不到的细胞膜、细胞质内的各种细胞器和细胞核的细微结构及其病理变化,并对其进行研究的技术。


【实验流程】


电镜检测.png

案例展示


 

技术总结

【常见问题】

1、取材时要迅速,组织从活体取下后应在最短时间内投入到固定液中;

2、样本体积不能过大,以免影响固定剂的渗透;

3、电镜标本制作中要注意室内的温湿度,湿度不能超过40%;

4、电镜标本制作所用液体,需4℃冷藏。


【注意事项】

1、处理好的样品为干燥无水固体,无易挥发溶剂;

2、观察面应该清洁,无污染物;

3、导电和导热性能好;

4、电子束下样品热稳性要好,且不会被电子束分解;

5、磁性较强样品要预先去磁。

送检与交付标准

样品类型样品需求保存条件运输条件备注
新鲜组织新鲜取材组织,用 PBS 清洗干净血液等,立即-80℃保存-80℃干冰所有样本均须有唯一标记,且标记清晰可识
一般固定组织一般组织体积不超过2cmX2cmX0.5cm,固定时尽量保持组织的原有形态并清理干净血液及多余部分,如肠道内容物;固定液体积为组织大小的10倍以上,容器足够容纳组织不使其挤压变形。标注好固定液类型和固定时长常温常温
特殊固定组织睾丸、眼球、脊髓、肌肉等组织:推荐使用对应的特殊固定液进行固定,以保证固定效果。如Bouin液,适用于睾丸组织、皮肤组织及眼球的固定

组织蜡块组织由标准的石蜡包埋盒包埋(尺寸为30*24*7mm),石蜡与组织要均匀接合,不能有裂痕;蜡块厚度根据所需切片的数量而定,有效厚度至少要超过 0.1cm。尽量提供半年内的组织蜡块,超过半年的蜡块抗原可能丢失,做免疫组化可能出现检测不到蛋白。常温常温
组织切片需用防脱载玻片进行捞片,并注明切片厚度、已烤片温度与时间,组织应在靠近切片下端 1/3 处。4℃冰袋
细胞爬片使用 12 孔板或 24 孔板专用细胞爬片,细胞爬片经固定后用 PBS 洗涤 2~3 次,保存在 PBS 中,用封口膜密封孔板。每个爬片在孔板盖上应有唯一的标记,并有电子版的分组信息,以防标记在运输途中模糊。常温常温
植物样本新鲜组织FAA固定,木质化程度不高;对于较薄的叶片,如果要求平行叶片切片,难以保证切完整;根茎要求直径>1mm常温常温
抗体保存抗体的抗体管上应有能够识别此抗体的标记,并附带说明书,抗体的量应大于实验所需的量。组织切片、组织芯片按稀释后 100μl 一张切片计算抗体用量, 24 孔板细胞爬片圆形盖玻片按稀释后 200μl 一张计算抗体用量,12 孔板细胞爬片圆形盖玻片按稀释后 400μl 一张计算抗体用量。-20℃冰袋或干冰




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