相关实验
实验承诺函
咨询记录
技术文章
城市
时间
国外
2024-04-26 22:52:41
福建省三明市
2024-04-26 18:30:27
河南省开封市
2024-04-26 17:01:24
浙江省宁波市
2024-04-26 15:39:34
河南省开封市
2024-04-26 11:36:58
江苏省苏州市
2024-04-26 10:49:31
湖北省十堰市
2024-04-26 10:19:09
国外
2024-04-25 21:24:20
国外
2024-04-25 19:31:50
福建省三明市
2024-04-25 17:32:37
TUNEL检测实验报告(二)
2024-04-22 15:05:35
TUNEL检测实验报告(一)
2024-04-22 13:44:20
TUNEL染色实验原理和实验操作技巧【详细篇】
2024-04-22 11:25:02
TUNEL染色原理介绍【组织染色】
2024-04-19 17:10:01
病理组织染色实验大全(二)
2024-04-08 16:24:35
激光共聚焦和荧光共聚焦的区别
2024-03-25 17:33:25
激光共聚焦实验目的
2024-03-25 16:10:39
激光共聚焦结果分析
2024-03-21 16:02:38
激光共聚焦实验步骤详解
2024-03-21 13:03:58
原位杂交方法【总结】
2024-03-19 14:11:07
原位杂交实验操作细节有哪些?
2024-03-15 16:47:17
原位杂交实验的应用
2024-03-15 15:04:52
原位杂交实验分析——原位杂交实验外包
2024-03-15 11:48:36
原位杂交目的
2024-03-14 13:51:45
原位杂交检测实验报告(五)
2024-03-13 16:42:10
原位杂交检测实验报告(四)
2024-03-13 14:43:26
荧光原位杂交检测实验报告(三)
2024-03-12 15:53:50
原位杂交检测实验报告(一)
2024-03-12 10:52:59
什么是原位杂交实验?(原位杂交实验外包)
2024-03-11 17:18:45
he染色中出现切片或染液、组织及盖载玻片的污染怎么办?
2024-02-26 16:29:45
为什么HE染色切片着色浅?
2024-02-23 17:21:56
HE染色和免疫组化的区别是什么?
2024-02-23 14:29:03
HE染色常见问题分析和解决方法【汇总】
2024-02-22 15:29:24
HE染色结果分析【HE染色实验】
2024-02-22 11:31:26
HE染色实验操作标准【附视频教程】
2024-02-20 16:12:33
HE检测实验报告(五)
2024-02-20 13:53:26
HE检测实验报告(四)
2024-02-18 17:10:46
HE检测实验报告(三)
2024-02-17 16:48:34
HE检测实验报告(二)
2024-02-17 15:15:55
HE检测实验报告(一)
2024-02-17 14:13:31
HE染色原理和意义【病理技术经验】
2024-02-02 17:32:17
免疫荧光结果判读【实验外包】
2023-12-15 13:20:21
免疫荧光染色操作步骤以及目的——组织
2023-12-13 10:39:52
免疫荧光染色操作步骤以及目的——细胞篇
2023-12-12 14:53:14
免疫荧光检测原理【病理实验外包】
2023-12-11 14:57:09
免疫荧光检测是什么?
2023-12-11 13:41:48
激光共聚焦的优点是什么?以及具体的实验流程
2023-06-30 14:04:22
一看就会的油红O染色实验指南【油红O染色外包】
2023-03-22 11:27:36
FISH染色实验步骤【FISH染色实验外包】
2023-03-15 17:28:26
什么是FISH技术?——科研小白打基础
2023-03-15 14:44:23
番红固绿染色原理,实验步骤以及需要注意什么?
2023-03-14 15:00:43
什么是TSA多色免疫荧光技术?【多色免疫荧光外包】
2023-02-27 15:43:56
油红O染色实验步骤与注意事项【油红O染色外包】
2023-02-02 16:14:38
什么是油红O染色?【油红O染色外包】
2023-02-02 15:25:25
动物组织甲苯胺蓝染色步骤【甲苯胺蓝染色外包】
2022-12-20 16:04:29
植物组织甲苯胺蓝染色步骤【甲苯胺蓝染色外包】
2022-12-20 15:56:43
植物组织番红固绿染色步骤【番红固绿染色外包】
2022-12-16 15:59:16
动物组织番红固绿染色步骤【番红固绿染色外包】
2022-12-16 15:50:56
什么是番红固绿染色?【番红固绿染色外包】
2022-12-16 15:35:05
TTC染色实验步骤
2022-12-09 11:25:46
TTC染色实验介绍
2022-12-09 11:08:22
考马斯亮蓝染色实验步骤
2022-12-09 10:09:58
考马斯亮蓝染色法实验介绍【考马斯亮蓝染色外包】
2022-12-09 09:48:05
刚果红染色实验步骤【刚果红染色外包】
2022-11-28 16:48:34
甲醇刚果红染色实验介绍【刚果红染色外包】
2022-11-25 15:09:01
组织芯片制作注意事项【组织芯片外包】
2022-11-25 09:55:26
组织芯片详细制作步骤【组织芯片代做】
2022-11-24 13:46:34
什么是组织芯片?【组织芯片外包】
2022-11-24 13:32:29
Tunel染色实验的常见问题与解决方法【细胞凋亡检测】
2022-09-08 16:10:09
Tunel染色实操注意事项【凋亡检测外包】
2022-09-07 14:29:38
Tunel染色实验原理与步骤详解【一看就会】
2022-09-06 18:01:49
病理组织染色实验大全(一)
2022-07-04 00:00:24
免疫荧光常见问题及其解决方法【附视频教程】
2022-06-29 15:39:16
免疫荧光实操注意事项汇总【附视频教程】
2022-06-29 15:28:34
细胞/组织免疫荧光实验操作步骤【附视频教程】
2022-06-29 15:14:19
什么是免疫荧光技术?【附视频教程】
2022-06-29 14:57:32
免疫组化和免疫荧光有什么区别?
2022-06-28 17:00:45
免疫组化/IHC染色常见问题及其解决方法 下【附视频教程】
2022-06-22 18:00:10
免疫组化(IHC)染色常见问题及其解决方法 上【附视频教程】
2022-06-22 16:02:17
免疫组化/IHC实验操作注意事项【附视频教程】
2022-06-22 14:16:11
免疫组化/IHC实验操作步骤【附视频教程】
2022-06-21 15:34:26
免疫组化实验技术介绍【科研人入】
2022-06-17 15:59:50
HE染色实验问题答疑【附视频教程】
2022-06-17 15:48:00
HE染色常见问题与处理方法【附视频教程】
2022-06-17 15:34:56
HE染色实操注意事项【附视频教程】
2022-06-15 15:52:21
HE染色实验操作步骤【附视频教程】
2022-06-14 18:37:39
什么是HE染色法?【附视频教程】
2022-06-10 13:58:36
冰冻切片与石蜡切片的区别—组织切片外包
2022-06-10 11:02:54
冰冻切片制片的影响因素—冰冻切片外包
2022-06-09 16:08:59
冰冻切片操作注意事项—冰冻切片外包
2022-06-09 11:07:48
冰冻切片详细操作步骤—冰冻切片外包
2022-06-07 14:15:44
冰冻切片实验介绍——冰冻切片外包
2022-06-01 16:27:22
原位杂交实验操作常见问题答疑
2022-05-30 14:56:34
原位杂交实验操作注意事项
2022-05-27 14:15:01
荧光原位杂交实验操作步骤【FISH实操】
2022-05-25 15:55:15
组织FISH实验操作步骤
2022-05-25 14:51:47
一文带你读懂原位杂交实验
2022-05-25 13:56:14
石蜡切片制作常见问题与解决方法【下】
2022-05-12 19:06:25
石蜡切片制作常见问题与解决方法【上】
2022-05-12 14:37:26
石蜡切片制作过程中的注意事项
2022-05-12 10:38:33
石蜡切片制作步骤——新人必看
2022-05-11 18:19:14
新手必看的石蜡切片实验介绍
2022-05-11 17:30:54
Masson(马松)染色操作步骤与结果分析【附视频教程】
2022-03-02 14:45:38
怎么区分IF/IHC/ICC?分别是什么意思
2022-02-23 11:10:51
甲苯胺蓝(TB)染色实验步骤【附图文视频教程】
2022-02-16 14:28:52
阿利新蓝染色实验原理与步骤
2022-02-10 17:30:59
β-乳糖苷酶染色实验意义与原理步骤
2022-02-10 15:31:24
TTC染色实验步骤与注意事项
2022-02-09 15:19:44
PAS糖原染色实验原理与步骤
2022-02-08 17:13:53
Masson染色实验原理与步骤
2022-01-24 10:31:55
实验介绍
【技术原理】
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180~200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素、生物素标记的dUTP,从而可以通过荧光显微镜或化学显色方法检测细胞凋亡的情况。
【实验流程】
案例展示
技术总结
【常见问题】
1、无/弱染色
烤片温度过高,推荐56℃-60℃1-2h;
一抗是否适用固定液和石蜡切片,使用浓度是否过低,孵育是否时间过短等。
2、染色过深
染色试浓度过高或孵育时间过长;
显色剂浓度过高或孵育时间过长。
【注意事项】
1、洗涤蛋白酶K时,一定要PBS冲洗3次,如果冲洗不净会严重干扰后续的标记反应;
2、3%的过氧化氢溶液孵育时间不应过长,否则会出现过氧化氢导致的DNA断裂,产生假阳性;
3、滴加TUNEL检测液时,可利用防蒸发膜防止其蒸发影响样本的生物素标记;配制好的DAB显色液必须一次性使用完毕,不宜冻存。
送检与交付标准
样品类型 | 样品需求 | 保存条件 | 运输条件 | 备注 |
---|---|---|---|---|
新鲜组织 | 新鲜取材组织,用 PBS 清洗干净血液等,立即-80℃保存 | -80℃ | 干冰 | 所有样本均须有唯一标记,且标记清晰可识 |
一般固定组织 | 一般组织体积不超过2cmX2cmX0.5cm,固定时尽量保持组织的原有形态并清理干净血液及多余部分,如肠道内容物;固定液体积为组织大小的10倍以上,容器足够容纳组织不使其挤压变形。标注好固定液类型和固定时长 | 常温 | 常温 | |
特殊固定组织 | 睾丸、眼球、脊髓、肌肉等组织:推荐使用对应的特殊固定液进行固定,以保证固定效果。如Bouin液,适用于睾丸组织、皮肤组织及眼球的固定 | |||
组织蜡块 | 组织由标准的石蜡包埋盒包埋(尺寸为30*24*7mm),石蜡与组织要均匀接合,不能有裂痕;蜡块厚度根据所需切片的数量而定,有效厚度至少要超过 0.1cm。尽量提供半年内的组织蜡块,超过半年的蜡块抗原可能丢失,做免疫组化可能出现检测不到蛋白。 | 常温 | 常温 | |
组织切片 | 需用防脱载玻片进行捞片,并注明切片厚度、已烤片温度与时间,组织应在靠近切片下端 1/3 处。 | 4℃ | 冰袋 | |
细胞爬片 | 使用 12 孔板或 24 孔板专用细胞爬片,细胞爬片经固定后用 PBS 洗涤 2~3 次,保存在 PBS 中,用封口膜密封孔板。每个爬片在孔板盖上应有唯一的标记,并有电子版的分组信息,以防标记在运输途中模糊。 | 常温 | 常温 | |
植物样本 | 新鲜组织FAA固定,木质化程度不高;对于较薄的叶片,如果要求平行叶片切片,难以保证切完整;根茎要求直径>1mm | 常温 | 常温 | |
抗体 | 保存抗体的抗体管上应有能够识别此抗体的标记,并附带说明书,抗体的量应大于实验所需的量。组织切片、组织芯片按稀释后 100μl 一张切片计算抗体用量, 24 孔板细胞爬片圆形盖玻片按稀释后 200μl 一张计算抗体用量,12 孔板细胞爬片圆形盖玻片按稀释后 400μl 一张计算抗体用量。 | -20℃ | 冰袋或干冰 |