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巨噬细胞分型(M1/M2)

根据活化状态、发挥功能以及分泌因子的不同,巨噬细胞主要可以分为经典活化的M1型巨噬细胞和选择性活化的M2巨噬细胞。 M1型巨噬细胞一般是通过干扰素-γ及细菌脂多糖(LPS)活化,M1主要分泌促炎因子,在炎症早期承担着重要作用。 M2型巨噬细胞通过Th2细胞因子如IL-4、IL-13及免疫复合物进行活化,M2表达抑制炎症因子,起着抑制炎症反应及组织修复的作用。M2巨噬细胞又可以分为三种亚型,分别为M2a、M2b、M2。

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实验介绍

【技术原理】

       流式利用不同荧光物质标记的单克隆抗体,与待测成分作用,然后上流式细胞仪检测待测细胞。待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列,一个个迅速通过激光聚焦区,激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物发出的信号,利用这些信号,可计算出相对含量,从而得到细胞群的相对比值。

       根据活化状态、发挥功能以及分泌因子的不同,巨噬细胞主要可以分为经典活化的M1型巨噬细胞和选择性活化的M2巨噬细胞。

       M1型巨噬细胞一般是通过干扰素-γ及细菌脂多糖(LPS)活化,M1主要分泌促炎因子,在炎症早期承担着重要作用。

       M2型巨噬细胞通过Th2细胞因子如IL-4、IL-13及免疫复合物进行活化,M2表达抑制炎症因子,起着抑制炎症反应及组织修复的作用。M2巨噬细胞又可以分为三种亚型,分别为M2a、M2b、M2。

       我们常用的检测指标:

       巨噬细胞(人):CD45 、CD14、CD86、 CD206

       巨噬细胞(鼠): CD45 、F4/80 、CD11b 、CD206


【实验流程】

组织:制成单细胞悬液-溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的标记抗体-孵育-离心去上清-上机

血液:溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的表面标记抗体-孵育-离心去上清-上机 

案例展示


送检与交付标准

样品类型样品需求运输条件
组织离体后组织制成单细胞悬液,加入PBS培养基内常温运输
活细胞样本量:1*106个细胞/TEST,加入PBS培养基内常温运输
血液将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内常温运输




流式交付标准.jpg