相关实验
实验承诺函
咨询记录
技术文章
城市
时间
河北省沧州市
2024-04-26 05:17:31
江苏省无锡市
2024-04-26 04:07:39
福建省三明市
2024-04-25 17:16:24
江苏省苏州市
2024-04-25 17:00:05
广东省深圳市
2024-04-25 15:24:23
江苏省
2024-04-24 12:27:52
江苏省无锡市
2024-04-24 01:05:31
四川省
2024-04-21 20:49:21
四川省
2024-04-21 20:27:10
浙江省温州市
2024-04-20 21:54:07
EMSA凝胶迁移实验结果分析【分子实验】
2024-04-10 17:27:43
EMSA凝胶迁移实验电泳图分析
2024-04-10 15:59:51
EMSA凝胶迁移实验步骤【EMSA实验外包】
2024-04-10 10:57:14
EMSA凝胶迁移实验分类【新人必看】
2024-04-09 17:38:55
EMSA凝胶迁移实验原理
2024-04-09 15:51:10
ELISA酶联免疫吸附试验常见问题以及解决
2024-04-01 09:59:09
ELISA实验步骤(详细篇)
2024-03-29 11:36:11
ELISA酶联免疫吸附试验实验目的
2024-03-27 18:19:23
ELISA酶联免疫吸附试验报告---ELISA实验外包
2024-03-27 17:07:44
酶切位点序列表
2023-12-07 13:54:00
常见酶切位点以及保护碱基
2023-12-04 11:34:17
酶切位点的详细步骤 【新手入门】
2023-11-27 16:51:17
分子互作实验大全(二)
2023-10-18 15:54:00
分子互作实验合集(一)
2023-06-28 14:41:31
Dot Blot实验方法以及操作步骤
2023-04-23 17:16:06
EMSA实验的步骤【EMSA实验外包】
2023-04-20 14:07:40
EMSA实验概念和原理
2023-04-20 13:35:05
southern blot原理和应用【超详细】
2023-04-18 17:12:50
southern blot实验流程
2023-04-18 15:59:52
northern blot实验作用和原理
2023-04-17 16:26:57
northern blot实验详细操作报告
2023-04-17 15:07:03
RNA pull-down实验原理介绍+实验步骤
2023-04-13 17:37:28
免疫共沉淀(Co-IP)实验技术【总结篇】
2023-04-12 16:22:35
免疫共沉淀—实验操作流程和步骤
2023-04-12 15:45:52
RIP检测实验流程
2023-04-10 15:18:43
酵母双杂交实验技术的作用
2023-04-10 11:24:24
酵母双杂交的实验原理和步骤
2023-04-06 17:10:00
GST pulldown实验结果分析
2023-04-06 15:13:02
GST pulldown实验步骤——看完就会
2023-04-04 13:27:09
CHIP实验步骤
2023-04-03 15:50:50
双荧光素酶检测实验步骤【超详细版】
2023-03-31 15:47:11
双荧光素酶报告测定的方法
2023-03-31 13:24:08
外泌体提取步骤【外泌体实验外包】
2022-12-21 16:31:13
什么是外泌体?【外泌体实验外包】
2022-12-20 16:43:54
免疫共沉淀实验详解大全【IP实验外包】
2022-12-19 14:46:15
RIP检测样本制备注意事项【RIP检测外包】
2022-12-19 13:54:21
RIP检测实验操作步骤【RIP检测外包】
2022-12-19 13:47:21
什么是RIP检测?【RIP检测外包】
2022-12-16 16:07:36
植物组织样本DNA提取步骤【收藏篇】
2022-12-06 09:47:06
动物组织样本DNA提取步骤【收藏篇】
2022-12-05 11:42:26
RNA Dot Blot斑点杂交实操步骤【Dot Blot外包】
2022-11-08 16:24:35
Dot blot斑点杂交实验原理与方法【Dot Blot外包】
2022-11-08 16:13:04
GST pulldown实验操作步骤【pull down外包】
2022-09-28 15:44:17
GST pulldown实验原理与介绍【pull down外包】
2022-09-28 15:32:38
DNA pulldown实验问题答疑【pull down外包】
2022-09-28 15:20:03
DNA pulldown实验操作步骤【pull down外包】
2022-09-28 14:57:03
DNA pull-dwon实验介绍【pull dwon外包】
2022-09-27 16:37:57
RNA pull-down实验问题答疑【pull-down实验外包】
2022-09-21 16:43:22
RNA pull-down注意事项与常见问题【pull-down外包】
2022-09-21 16:02:34
RNA pull-down详细实验步骤【pull-down实验外包】
2022-09-21 14:39:31
什么是RNA pulldown实验?【RNA pulldown外包】
2022-09-21 10:34:10
酵母杂交实验的常见问题—试剂篇【酵母杂交实验外包】
2022-09-20 13:50:17
酵母杂交实验的常见问题—转化篇【酵母杂交实验外包】
2022-09-20 10:39:04
酵母单杂交实验详细步骤【酵母单杂外包】
2022-09-16 14:49:20
什么是酵母单杂实验?【酵母单杂外包】
2022-09-16 14:30:48
酵母双杂交常见问题及解决方法下【酵母双杂外包】
2022-09-16 14:10:21
酵母双杂交常见问题及解决方法上【酵母双杂外包】
2022-09-16 13:58:45
酵母双杂实验注意事项【酵母双杂外包】
2022-09-13 11:25:17
酵母双杂详细操作步骤【酵母双杂外包】
2022-09-09 14:30:11
什么是酵母双杂系统?【酵母双杂外包】
2022-09-08 17:53:33
EMSA凝胶迁移实验常见问题与注意事项
2022-05-10 15:38:21
EMSA实验详细操作步骤【新人干货】
2022-04-28 14:12:33
EMSA凝胶迁移实验原理介绍
2022-04-28 11:41:04
Southern blot印迹杂交实验常见问题与注意事项【干货】
2022-04-28 10:39:07
Southern Blot印迹杂交实验操作步骤【分步详解】
2022-04-28 10:25:35
Southern Blot印迹杂交实验介绍——新人必看
2022-04-28 10:21:26
Northern Blot印迹杂交实验详细操作步骤
2022-04-21 22:23:24
Northern Blot印迹杂交实验介绍——新人必看
2022-04-21 21:42:38
Co-IP免疫共沉淀实验常见问题及解决方法【附视频教程】
2022-04-21 20:56:48
Co-IP免疫共沉淀实操注意事项【附操作视频】
2022-04-19 13:38:07
Co-IP实验详细操作步骤【附视频教程】
2022-04-18 11:46:33
Co-IP免疫共沉淀实验介绍【附视频介绍】
2022-04-15 13:25:53
CHIP实操常见问题与解决方法总结大全
2022-04-13 17:27:43
CHIP实验操作注意事项干货!【附视频教程】
2022-04-13 15:16:34
CHIP实验操作详细步骤【附视频教程】
2022-04-13 13:49:55
实验新手的CHIP实验简介与原理【附视频教程】
2022-04-08 17:55:34
双荧光素酶报告基因实验常见问题与解答【附操作教程】
2022-03-25 15:19:16
双荧光素酶报告基因实验操作注意事项【附操作视频】
2022-03-25 14:39:25
双荧光素酶报告基因实验详细操作步骤【附视频教程】
2022-03-24 14:46:15
双荧光素酶报告基因实验原理与简单介绍【新手入门】
2022-03-23 17:26:04
CHIP、RIP、COIP有什么区别?——CHIP/RIP/COIP检测外包
2022-03-05 16:25:22
Western blot检测实验常见问题原因及解决方法(下)
2022-03-03 13:39:04
Western blot检测实验常见问题原因及解决方法(中)
2022-03-02 13:05:03
Western blot检测实验常见问题原因及解决方法(上)
2022-03-01 15:22:46
【国自然热点文献分享】之表观遗传乙酰化-高分
2022-02-28 15:34:03
泛素化看过,连续泛素化看过吗?(二)
2022-02-28 15:34:03
Western blot检测_蛋白质免疫印迹实验注意事项—新手必看超全
2022-02-28 15:34:03
Western blot检测_蛋白质免疫印迹实验步骤及视频教程
2022-02-18 16:08:31
circRNA和成肌细胞增殖、促进分化和骨骼肌再生的关系——高分文献解读
2022-01-10 14:39:31
分子生物学实验介绍-PCR篇
2021-12-31 10:05:32
泛素化看过,连续泛素化看过吗?(一)
2021-12-24 15:48:13
【国自然热点文献分享】之表观遗传苏木化
2021-11-23 09:57:21
【国自然热点文献分享】之表观遗传之泛素化-高分文章
2021-11-18 08:55:21
【国自然热点文献分享】之表观遗传之泛素化
2021-11-18 08:44:58
表观遗传之泛素化
2021-10-26 14:53:05
让你的lncRNA摆脱miRNA的束缚(完结篇)
2021-10-18 10:19:17
【国自然热点文献分享】表观遗传乙酰化
2021-10-13 14:59:17
当lncRNA遇到m6A修饰
2021-10-12 14:27:20
让你的lncRNA摆脱miRNA的束缚(中)
2021-10-09 09:43:19
让你的lncRNA摆脱miRNA的束缚(上)
2021-09-29 13:42:18
实验介绍
【应用简介】
核酸和蛋白质是组成生命的主要物质,研究细胞内RNA与蛋白结合情况,可以了解转录后调控网络的动态过程,帮助我们发现的miRNA的调节靶点,RIP检测实验是应用于蛋白与RNA互作关系的重要参考。
【技术原理图】
【实验方法】
第一步:细胞裂解液的制备
第二步:磁珠与抗体的准备
第三步:RNA结合蛋白免疫沉淀
第四步:用蛋白酶ķ对RNA-蛋白复合物进行消化
第五步:RNA纯化
第六步:对结合在复合物上的RNA反转录,合成cDNA
第七步:Q-PCR验证RNA
案例展示
技术总结
【常见问题】
1、经过免疫沉淀后的RNA浓度过低;
2、Input组目的条带无扩增;
3、RNA纯度未在1.8-2.1之间;
4、阴性对照IgG反应中有目的条带。
【注意事项】
1、RIP反应体系中的试剂和抗体中均需保证无RNA酶;
2、细胞样本的数量较大,应按照所需要求提供细胞样本数量;
3、选购的相应的抗体应达到IP实验级别,并通过阴性实验反馈结果可信性。
送检与交付标准
样品类型 | 样品需求 | 保存条件 | 运输条件 | 备注 |
---|---|---|---|---|
动物组织 | 单个样品>0.1g,2mlEP管或冻存管装,不要过量;样本应尽量新鲜,如不能立即提取蛋白或核酸,应液氮速冻后冻存于-80℃或更低,冻存样本避免反复冻融以致降解 | -80℃ | 干冰 | 所有样本均须有唯一标记,且标记清晰可识 |
种子样本 | 去壳新鲜或保存于液氮中的的种子样本,单个样品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
贴壁/悬浮细胞 | 1. 总RNA或蛋白:106cell/指标、浆/核RNA或蛋白:107cell/指标、线粒体RNA或蛋白:2*107 cell/指标,样本尽量新鲜,细胞收取后直接加Trizol(QPCR检测)或直接冻存于-80℃ 2. 若细胞处理(加药、转染、感染)后状态差应酌情加大收样量 | -80℃ | 干冰 | |
全血/血清样品 | 用抗凝管保存的外周血 5~10ml,骨髓 1~3ml; -80℃保存不超半周的白细胞匀浆>400μl,每 400μl 加入 400μl Trizol。 | -80℃ | 干冰 | |
石蜡包埋样品 | 由标准的石蜡包埋盒包埋的石蜡块,有效厚度大于 0.1cm; 新鲜的 FFPE 组织切片,每片厚度不超过 10μm,2~8 张,表面积不超过 250mm2。 | -20℃ | 冰袋 | |
抗体 | 1. 按样本种属提供满足相应实验要求的抗体; 2. 按抗体说明书要求寄送,尽量避免分装;如分装,确保量足够进行实验,并提供抗体说明书。 3.保存抗体的抗体管上应有能够识别此抗体的标记,抗体的量应大于实验所需的量。 | -20℃ | 冰袋 | |
引物 | 干粉,≥1OD,如进行预实验,每个基因至少提供两对引物, 附带公司引物合成单。 | -20℃ | 冰袋或常温 |