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Th1/2/9/17/22亚群检测

Th1/2/9/17/22亚群检测,我们常用的检测指标:CD4、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17A、IL-22。

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实验介绍

【技术原理】

流式利用不同荧光物质标记的单克隆抗体,与待测成分作用,然后上流式细胞仪检测待测细胞。待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列,一个个迅速通过激光聚焦区,激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物发出的信号,利用这些信号,可计算出相对含量,从而得到细胞群的相对比值。

Th1细胞是IFN-γ+ IL-12极化的T辅助细胞,可驱动巨噬细胞的杀灭作用和对病原体的杀伤作用。它们的特征在于转录因子T-bet的表达,并产生细胞因子:IL-2,IFN-γ和TNF。

Th2细胞是IL-4极化的T辅助细胞,可刺激对感染的体液反应,包括B细胞增殖,类别转换和抗体产生增加。它们的特征在于转录因子GATA3的表达并产生细胞因子:IL-4,IL-5,IL-6,IL-10和IL-13。

Th9细胞是最近表征的T辅助细胞的子集,在预防细胞外寄生虫(尤其是线虫)中发挥作用。Th9细胞通过IL-4和TGF-β从幼稚细胞极化。尽管它们与Th2不同,但Th9细胞可以通过TGF-β的作用从Th2细胞衍生而来。尽管产生抗炎性IL-10,它们仍与炎性疾病如过敏性炎症相关。

Th17细胞是活化T辅助细胞的独特子集,通常在上皮和粘膜屏障上提供抗微生物免疫。它们也与多种自身免疫疾病有关。Th17细胞的特征在于其细胞内RORγt和STAT3的表达以及细胞因子(IL-17A,IL-17F,IL-21和IL-22)的产生。在人类中,可以使用CD4,CD161和CCR6的细胞表面标记物识别它们。

Th22细胞是促炎性T辅助细胞的新子集,其正常功能尚未完全确定,尽管建议它们参与皮肤免疫。它们与多种自身免疫性疾病有关,例如类风湿性关节炎,克罗恩氏病,牛皮癣和特应性皮炎。尽管与具有细胞表面受体的Th17细胞和IL-22的产生表现出一些相似之处,但Th22细胞的特征在于其被TNF-α极化,芳基烃受体和CCR10的表达以及缺乏IL-17的产生。

我们常用的检测指标:CD4、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17A、IL-22。


【实验流程】

组织:制成单细胞悬液-溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的标记抗体-孵育-离心去上清-上机

血液:溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的表面标记抗体-孵育-离心去上清-上机 

案例展示


注意事项

血液样本量需提供5-10ml。

送检与交付标准

样品类型样品需求运输条件
组织离体后组织制成单细胞悬液,加入PBS培养基内常温运输
活细胞样本量:1*106个细胞/TEST,加入PBS培养基内常温运输
血液将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内常温运输



流式交付标准.jpg