案例一
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实验介绍
【应用原理】
抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量。
【技术总结】
一、常见问题
1、无/弱染色
烤片温度过高,推荐56℃-60℃1-2h;
一抗是否适用固定液和石蜡切片,使用浓度是否过低,孵育是否时间过短等。
2、非特异性背景染色
是否灭活内源性过氧化物酶;
孵育过程中干片;
抗原热修复过度。
3、染色过深
一抗浓度过高;
染色试剂浓度过高或孵育时间过长。
二、注意事项
1、使用3%过氧化氢溶液消除内源性过氧化酶活性时,请勿孵育过长时间,一般为5—10分钟;
2、对于较易产生脱片的部分组织如皮肤、骨组织、脑组织等尽量避免使用微波修复和高压修复,减少其脱片的风险;
3、使用DAB显色时,显色剂停留时间过长会造成染色过深,可根据实验温度及实验结果适当调整染色时间。
【送检标准】

【交付标准】
1、实验报告
2、真实实验结果
3、原始图片
4、实验原始数据
5、剩余物料在周期内可返还(超过周期,不予返还)
技术文章
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