【实验原理】

ELISA采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

在这种测定方法中有3种必要的试剂：

①固相的抗原或抗体（免疫吸附剂）；②酶标记的抗原或抗体（标记物）；③酶作用的底物（显色剂）。

测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。

【实验方法】

1、 加待测样，温育、洗涤

2、 加酶标抗体，温育、洗涤

3、 加底物，温育 显色

4、 加终止液

5、读数

【技术总结】

加样本和反应试剂时必须注意避免以下几点：

1、加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。需匀速加样，吸样时，加样枪需按到第一档，加样时，加样枪需直接按到底；

2、加样应直接加入反应孔底部，加在反应孔壁上易溅出会对邻近孔产生污染。尽量避免出现气泡；

3、反应试剂的加入时先要注意试剂的有效期，再注意滴加的角度和滴加速度。滴加太快易出现重复滴加在两孔之间。

【送检标准】

【交付标准】

1、实验报告

2、真实实验结果

3、原始图片

4、实验原始数据

5、剩余物料在周期内可返还（超过周期，不予返还）