酶联免疫吸附实验原理及操作方法

2026-09-21

来源/作者:普拉特泽生物-医学整体课题外包

    蛋白定量是分子与细胞实验里绕不开的一环,而ELISA(酶联免疫吸附实验,Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),凭借灵敏度高、通量灵活、适合体液 / 上清 / 组织样本等优势,至今仍是科研中最常用的蛋白检测技术。 普拉特泽生物可提供全套 ELISA 外包检测服务,覆盖样本前处理、试剂盒选择、实验操作、数据整理与结果解读,助力各位老师快速拿到可靠定量数据。
原理:
    酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)是指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固定载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。结合在固相载体表面的抗原或抗体保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体保留免疫学活性同时又保留酶的活性。

    在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应,通过洗涤将固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开,再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶:反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行:定性或定量分析。


ELISA 常见 4 种实验类型

直接法:包被抗原,酶标记一抗直接结合。步骤少,但特异性一般,较少用于样本检测。 

间接法:包被抗原,一抗结合后,酶标二抗识别一抗。适合抗体效价检测,信号有放大。 

竞争法:样本抗原与已知标记抗原竞争结合有限抗体。适合小分子抗原、半抗原检测(激素、毒素、药物)。 

双抗体夹心法:最常用!包被捕获抗体,抓取样本内目标抗原,再加入检测抗体形成 “夹心复合物”。适合大分子蛋白、细胞因子定量,本项目绝大多数细胞因子、炎症蛋白都选用夹心法 ELISA。

普拉特泽 ELISA 检测服务包含哪些?

✔ 方案评估:样本类型、靶点、预期浓度评估,推荐合适试剂盒与实验方法 ✔ 样本前处理:组织匀浆、蛋白提取、样本稀释、样本保存质控 ✔ 正式实验:包被、封闭、加样、孵育、洗板、显色、酶标仪读数 ✔ 原始数据:OD 值、标准曲线、R²、样本浓度计算结果 ✔ 结果解读:协助分析异常样本、高低值原因,可提供图注、结果描述,适配文章作图

适用课题方向

动物体内炎症模型、细胞给药因子分泌检测、毒理实验、药物筛选、临床样本标志物检测,可搭配WB、IHC、免疫荧光、TEM、组织病理 HE 染色多组实验联合验证,多维度支撑 SCI 课题。

结尾

蛋白定量选 ELISA,稳定的实验重复性是文章数据的底气。 如果您有细胞因子、蛋白标志物定量需求,欢迎咨询普拉特泽生物,一站式 ELISA 外包检测,省心高效。

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