GUS（β-glucuronidase，β-D-葡萄糖苷酸酶）基因是目前常用的一种报告基因，其表达产物β-葡萄糖苷酸酶是一种水解酶，能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解，它可以将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（5-bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，缩写为X-Gluc）分解为蓝色物质。

ERK 通路的激活使 METTL3 和 WTAP 磷酸化。METTL3 的磷酸化增加了与 USP5 的相互作用，减少了泛素化，因此稳定m[6]A甲基转移酶复合物促进m[6]A。ERK/METTL3/WTAP 信号轴的激活促进干细胞分化和肿瘤发生。

CircFgfr2的功能和机理分析揭示了一种由环状RNA介导的调节肌发生和肌肉再生的自调控反馈环，为进一步了解其调控机制提供了新的思路。

体外培养动物细胞已有近百年的历史，人工合成培养基的问世促进了细胞培养工作的发展。当粉剂合成培养基配置成液体后称为培养液，其主要成分是氨基酸、维生素、糖类、无机离子以及其他成分。合成培养基种类很多，常用的有十多种，目前使用最广泛的是RPMI 1640，MEM，DMEM和DMEM/F12。

PCR（Polymerase Chain Reaction）原理： 即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。

用ELISA测定相关炎症因子，来阐明巨噬细胞中Cbl-可选择性抑制由不同毒素诱导经典及非经典NLRP3炎性小体的IL-1β释放，而并不抑制TLRs信号通路。之后在腹腔注射LPS（5 mg/kg）及盲肠结扎穿刺诱导的内毒素血症模型中，发现Cbl-b基因缺失小鼠更易致死。因此认为Cbl-b可能是内毒素血症缓解的重要因子。

苏木化修饰是苏木小体在一系列相关酶（E1活化酶、E2结合酶和E3连接酶）的作用下，通过SUMO的3’端和靶蛋白的赖氨酸残基的ε-氨基之间形成异肽键的结合，调控底物蛋白结构与功能的一种重要的翻译后修饰类型。苏木化在生理及病理过程中扮演着重要的角色，与很多疾病息息相关，如，肿瘤、心血管系统疾病、脑损伤疾病等。所以说，通过两篇文献来get一下这个知识点是非常有必要的呦~

这次分享的文献题目是：CHIP-mediated CIB1 ubiquitination regulated epithelial-mesenchymal transition and tumor metastasis in lung adenocarcinoma，影响因子为15.820分，发表在Cell Death & Differentiation杂志上，发表时间为2020年10月，该文章主要探究了CHIP介导CIB1泛素化过程，从而调控肺腺癌的上皮-间质转化和肿瘤的转移。接下来通过作者得到的实验结果来分析这篇文章吧!

泛素化是指泛素（一类低分子量的蛋白质）分子在一系列特殊的酶作用下（涉及泛素激活酶E1、泛素结合酶E2和泛素连接酶E3），将细胞内的蛋白质分类，从中选出靶蛋白分子，并对靶蛋白进行特异性修饰的过程。泛素化在蛋白质的定位、代谢、功能、调节和降解中都起着十分重要的作用。而且，它还参与细胞周期、增殖、凋亡、分化、转移、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控。泛素化与多种疾病类型如肿瘤、心血管等发病密切相关。因此，泛素化的研究越来越多

肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-associated macrophages，TAMs）是指浸润在肿瘤组织中的巨噬细胞，是肿瘤微环境（TME）的重要组成

缺氧条件下的部分乳腺癌细胞，通过DNA甲基化的作用机制，降低了HIF-1α在EGFR基因上结合位点的甲基化水平，从而促进了EGFR的表达，在这种情况下，EGFR抑制剂对乳腺癌细胞的敏感性更强。

通过经典的m6A实验“dot blot”，发现缺氧能导致CMECs细胞整体m6A水平的减弱，从一堆m6A相关基因中，作者找到了关键因子ALKBH5，并发现其异常表达影响内皮细胞的血管生成能力。