大家好，今天普拉特泽生物带大家学习一个新的概念——细胞增殖检测。细胞增殖检测是评估细胞活性、药物筛选及疾病机制研究的关键技术。，面对CCK-8、MTT、EdU等主流方法，如何选择最适配的实验方案？普拉特泽生物细胞平台为广大科研工作者提供细胞增殖检测实验外包服务，本文结合最新研究数据与实验室实操经验，系统解析5大方法的原理、优缺点及适用场景，助您高效决策！

一、三大核心方法对比

1. MTT法：经典但渐被替代

▲原理：活细胞线粒体酶将MTT还原为蓝紫色甲臜晶体，溶解后测吸光度（570nm）13。

优点：

 成本低廉（单次成本约0.5元）

 灵敏度较高（检测限约1000个细胞）

▲缺点：

 需溶解步骤（DMSO或异丙醇），操作繁琐

 细胞毒性强，终止实验后无法继续培养

 背景干扰大（血清、沉淀物影响吸光度）

2. CCK-8法：高效升级版

原理：水溶性WST-8被还原为橙黄色甲臜，直接测450nm吸光度，无需溶解29。

优点：

 操作简便，适合高通量筛选（96/384孔板）

 无细胞毒性，检测后细胞可继续培养

 灵敏度提升30%（检测限约500个细胞）

缺点：

 成本较MTT高（试剂价格约2倍）

 高浓度血清可能干扰结果

3. EdU法：DNA合成的金标准

原理：EdU掺入新合成DNA，通过“点击化学”与荧光探针结合，直接标记增殖细胞67。

优点：

 无需抗体或DNA变性，操作时间缩短50%

 单细胞分辨率（流式/荧光显微镜）

 兼容组织切片与活体检测

缺点：

 需荧光设备支持，成本较高

 对DNA损伤敏感，可能漏检低增殖活性细胞

二、扩展方法：ATP检测与CFSE标记

4. ATP检测法（化学发光）

原理：ATP含量与活细胞数正相关，利用荧光素酶发光定量810。

适用场景：超高通量筛选（10分钟出结果）

局限：无法区分增殖与非代谢活跃细胞

5. CFSE荧光标记法

原理：荧光染料随细胞分裂稀释，通过流式检测增殖代数45。

优势：动态追踪细胞分裂史（适合免疫细胞研究）

局限：仅适用于悬浮细胞，操作复杂

三、选择决策树：5大场景推荐

四、2025技术趋势展望

〖1〗3D培养专用试剂：如CCK-3D试剂盒，适配类器官与微球体检测6。

〖2〗活体动态追踪：新型遗传技术ProTracer实现长时间、组织特异性增殖记录（如肝脏再生研究）。

〖3〗AI图像分析：结合深度学习自动识别EdU标记细胞，减少人工误差

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