大家好！今天普拉特泽生物继续带大家一起学习新动物模型——脓毒症（Sepsis）是机体对感染反应失调导致的危及生命的器官功能障碍，建立可靠的动物模型对阐明脓毒症发病机制、开发新型治疗策略至关重要。普拉特泽生物将详细对比CLP（盲肠结扎穿孔）和LPS（脂多糖注射）两种最常用的脓毒症建模方法，提供标准化操作流程和实用技巧。

一、CLP模型：临床相关性最高的金标准

1. CLP模型原理与优势

①CLP通过盲肠结扎+穿孔诱导多微生物腹膜炎，最接近临床脓毒症病理过程：

②模拟肠道菌群移位导致的全身炎症反应

③可分级控制疾病严重程度（通过结扎长度和穿孔大小调节）

④适用于脓毒症全程研究（包括高炎症期和免疫抑制期）

2. 标准化操作流程（以C57BL/6小鼠为例）

⑴术前准备

①动物选择：8-12周龄雄性小鼠（雌性激素影响炎症反应）

②禁食处理：术前禁食12小时（不禁水）

③麻醉方案：异氟烷吸入麻醉（2%诱导，1.5%维持）

⑵手术步骤

腹部备皮消毒：10%聚维酮碘溶液消毒

正中切口：约1cm切口暴露盲肠

⑴盲肠处理：

结扎50%盲肠长度（4-0丝线）

21G针头贯通穿刺2次

脏器还纳：轻柔挤压排出少量粪便

关腹缝合：6-0可吸收缝线分层缝合

⑵术后管理：

液体复苏：预热生理盐水（1mL/20g）皮下注射

镇痛：布托啡诺（5mg/kg）每12小时一次

⑶监测指标：

72小时存活率（通常控制在40-60%）

体温（<34℃提示严重脓毒症）

活动度评分（0-5分量表）

3. 关键优化点

穿孔大小控制：21G针头（重度）vs 25G（中度）

菌群预处理：术前3天饮用2%硫酸新霉素可提高一致性

时间窗口：6-12小时（高炎症期）vs 24-72小时（免疫抑制期）

二、LPS模型：简便可控的急性炎症模型

1. LPS模型特点

操作简便：无需手术

高度可重复：剂量依赖性反应

局限性：仅模拟内毒素血症早期炎症阶段

2. 标准化方案

剂量选择（腹腔注射）

严重程度LPS剂量（mg/kg）适用研究

时间进程

①炎症峰值：2-6小时（TNF-α、IL-6）

②器官损伤：12-24小时（ALT/Cr升高）

③恢复期：48-72小时

3. 改良方案

复合模型：LPS+D-半乳糖胺（增强肝损伤）

滴注模型：静脉持续输注（模拟临床进展）

三、CLP与LPS模型对比指南

四、模型验证与评价体系

1. 核心检测指标

生理参数：

体温（红外热成像）

呼吸频率（全身体积描记）

血清标志物：

炎症因子（IL-6、TNF-α ELISA）

器官损伤（ALT、Cr、LDH）

组织病理：

肺/肝/肾HE染色

免疫组化（HMGB1、NF-κB）

2. 严重程度分级标准

五、常见问题解决方案

⒈CLP术后存活率过高？

增加穿孔直径（改用19G针头）

延长盲肠结扎长度（至75%）

取消术后抗生素

⒉LPS反应不显著？

⑴验证LPS活性（鲎试剂检测）

⑵改用静脉注射（避免腹腔代谢差异）

⑶联合ATP注射（增强NLRP3激活）

⒊模型变异大？

⑴固定手术操作者

⑵使用同批次动物

⑶术前适应性饲养≥7天

六、配套产品推荐

㈠CLP手术套装：

专用手术器械（含微创牵开器）

可吸收缝合线（6-0 PDSⅡ）

㈡检测试剂盒：

脓毒症细胞因子阵列（含IL-1β/6/10/TNF-α）

器官损伤标志物检测（ALT/Cr/BUN联检）

㈢替代模型方案：

粪液注射模型（FIP）

细菌静脉输注系统

结语：模型选择决策树

普拉特泽，坚持提供真实、完整、唯一原始数据、原始图片。

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