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​DNA甲基化实验介绍【科研小白】

2022-05-13 10:27:04

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

        DNA甲基化实验介绍由普拉特泽生物总结分享。DNA甲基化为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。普拉特泽生物表达检测平台为广大科研人员提供DNA甲基化检测实验,用丰富的实战操作经验给出高质的结果。


        那么现在我们来看看,什么是DNA甲基化呢?

        DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。

        DNA甲基化的实验原理是:基因组中DNA的甲基化模式是通过DNA甲基转移酶实现的。DNA甲基化酶分为2类,即维持DNA甲基化转移酶(Dnmtl或维持甲基化酶)和从头甲基化酶。根据序列的同源性和功能,真核生物DNA甲基化转移酶又分为4类:Dnmtl/METlDnmt2CMTsDn-mt3DnmtliiMETl类酶参与CG序列甲基化的维持。CMTs类酶仅发现在植物中,主要特征是它的催化区T包埋染色体的主区,并且特异性地维持CG序列的甲基化。Dnmt:3类酶在小鼠、人类和斑马鱼中得到鉴定.Dnmt3aDnmt3b在未分化的胚胎干细胞中高度表达,但在体细胞中表达水平很低。它们的主要作用是从头甲基化,但对维持甲基化也起到一定的作用,并且负责重复序列的甲基化。

        DNA甲基化类型:DNA甲基化反应分为2种类型。一种是2条链均未甲基化的DNA被甲基化,称为从头甲基化(denovo methylation);另一种是双链DNA的其中一条链已存在甲基化,另一条未甲基化的链被甲基化,这种类型称为保留甲基化(maintenance methylation)。

        DNA甲基化(methylation)是真核细胞正常而普遍的修饰方式,也是哺乳动物基因表达调控的主要表观遗传学形式。DNA甲基化后核苷酸顺序及其组成虽未发生改变,但基因表达受影响。尽管甲基化修饰有多种方式,被修饰位点的碱基可以是腺嘌呤的N-6位、胞嘧啶的N-4位、鸟嘌呤的N-7位和胞嘧啶的C-5位,它们分别由不同的DNA甲基化酶催化,但大多发生在基因启动子区CpG岛上。DNA甲基化时,胞嘧啶从DNA双螺旋上突出,进入能与酶结合的裂隙中,在胞嘧啶甲基转移酶催化下,把活性的甲基从S一腺苷甲硫氨酸转移至胞嘧啶5位上,形成5一甲基胞嘧啶(5MC)。基因启动子区的甲基化可导致转录沉寂。

        细胞发育过程中,各种表观遗传学现象之间不是孤立存在而是密切联系的。DNA甲基化同组蛋白甲基化共同调控基因表达的现象最早在链孢霉(Neurospora crassa)中得到证实,进一步的生化研究结果表明,DNA甲基化是受组蛋白甲基化调节的。对哺乳动物的研究发现,DNA甲基化是建立和维持其他表观遗传学现象的基础,比如DNA甲基化位点可以募集诸如组蛋白去乙酰化酶等具有抑制功能的复合物,同时除掉该位点附近的组蛋白乙酰化标记。也有研究认为,DNA甲基化是受组蛋白修饰调控的,有报道称组蛋白修饰H3K9me能够促进DNA甲基化的进程。

        那么关于甲基化的简单介绍,我们就说到这里啦,更多关于DNA甲基化的问题欢迎随时留言哦。

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