小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型的标准化操作流程由普拉特泽生物技术为大家总结分享。前面我们学习了什么是脑缺血动物模型构建、脑缺血动物模型构建全攻略、脑缺血模型假手术组设置指南以及小鼠 vs 大鼠脑缺血模型可以点击标题直接传送回去学习的哦。普拉特泽生物动物检测平台承接脑缺血动物模型外包上百例，包括术前准备、手术步骤、术后护理等关键环节，并针对实验中常见问题提供专业解决方案。MCAO模型作为研究缺血性脑卒中的金标准，其规范操作对实验结果的可靠性至关重要，本篇将系统介绍MCAO模型的标准化操作流程，并针对实验中的常见问题进行专业解析。

前期回顾：

什么是脑缺血动物模型构建？

脑缺血动物模型构建全攻略：从MCAO到光血栓法的选择与应用

脑缺血模型假手术组设置指南：如何科学避免假阳性结果？

小鼠 vs 大鼠脑缺血模型：如何选择最适合的研究模型？
一、MCAO模型概述

1.1 模型原理

MCAO模型通过机械性阻塞大脑中动脉(MCA)，导致其供血区域脑组织缺血损伤，进而模拟人类缺血性脑卒中的病理生理过程。

1.2 模型分类

▲永久性MCAO：持续阻塞MCA，不恢复血流

▲短暂性MCAO(tMCAO)：暂时阻塞后恢复血流，模拟临床溶栓治疗

1.3 应用价值

○研究缺血性脑损伤机制

○评价神经保护药物疗效

○探索脑卒中后恢复机制

二、标准化操作流程(SOP)

2.1 术前准备

2.1.1 实验动物选择

品系：C57BL/6或SD大鼠

体重：22-28g

术前禁食4-6小时(自由饮水)

2.1.2 主要试剂与仪器

2.2 手术步骤

2.2.1 麻醉与固定

诱导麻醉：4%异氟烷

维持麻醉：1.5-2%异氟烷

仰卧位固定，维持体温37±0.5℃

2.2.2 颈部解剖

①颈部正中切口(约1cm)

②分离右侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)

③结扎ECA远心端及CCA近心端

2.2.3 栓线插入

①ECA剪小口插入栓线

②缓慢推进至ICA分叉处(约9-10mm)

③确认血流下降≥70%(激光多普勒监测)

2.2.4 再灌注(tMCAO)

①缺血30-60分钟后缓慢退出栓线

②确认血流恢复至基线80%以上

2.2.5 缝合与复苏

缝合皮肤切口

停麻醉，37℃暖箱复苏

2.3 术后护理

①皮下注射生理盐水(0.5mL)防止脱水

②疼痛管理：布洛芬(5mg/kg)

三、常见问题解析

3.1 手术操作问题

问题1：栓线插入困难

可能原因：动脉痉挛或角度偏差

解决方案：

使用罂粟碱浸泡栓线

调整插入角度

术前训练显微操作技术

问题2：脑血流下降不足

可能原因：栓线未到位或MCA变异

解决方案：

⑴更换合适直径的栓线

⑵术前解剖确认MCA分支

⑶使用激光多普勒实时监测

3.2 模型评价问题

问题1：神经功能评分不准

解决方案：

采用标准化评分量表(mNSS、Bederson)

双盲法评估

统一评分标准

问题2：梗死体积变异大

解决方案：

TTC染色时统一切片厚度(2mm)

严格控制缺血时间

使用图像分析软件定量

3.3 术后并发症管理

四、质量控制要点

⑴栓线选择：直径匹配小鼠体重(0.21mm/25g)

⑵缺血时间：通常30-60分钟

成功率标准

⑴术后24小时死亡率<20%

⑵梗死体积占同侧半球30-50%

五、替代方案比较

最后规范的MCAO模型操作对脑卒中研究至关重要。通过严格遵循SOP、优化手术细节和及时解决问题，可显著提高模型成功率和实验数据的可靠性。建议研究者在正式实验前进行充分的预实验和技术训练。
如果你总是在做实验时总会遇上这样那样的问题需要帮助时，请记得在小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型中遇到技术问题可添加技术微信：18570028002

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