细胞增殖实验注意事项由普拉特泽生物为大家总结分享，普拉特泽生物细胞实验平台专业承接血管生成实验外包、细胞诱导/分化等细胞实验代做服务，积累专业丰富的实验操作经验。上期我们分享细胞增殖检测常见问题与解决方案后大家都说不够详细，有一些注意事项没有写出来，那今天咱们就为大家专门出一期裸细胞增殖实验避坑指南，快点学起来吧~

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一、实验前的准备工作

（一）细胞株的选择与复苏

选择合适的细胞株是实验成功的基础。需根据研究目的挑选特性相符的细胞，比如研究肿瘤细胞增殖，就要选用具有代表性的肿瘤细胞系。同时，要确保细胞株来源可靠，避免使用传代次数过多、状态不佳的细胞。

●复苏细胞时，严格遵循 “快融” 原则，将冻存管迅速放入 37℃水浴锅中，不断晃动使其快速融化，防止冰晶对细胞造成损伤。复苏后的细胞要及时进行活力检测，只有活力良好的细胞才能用于后续实验。

（二）实验耗材与试剂的准备

实验耗材的质量对实验结果影响显著。培养板、移液枪头、离心管等耗材必须保证无菌、无内毒素，建议选择正规厂家生产的产品。对于一次性耗材，避免重复使用，防止交叉污染。

●试剂方面，培养基、血清、检测试剂等都要注意保存条件和保质期。例如，血清应储存在 - 20℃环境中，避免反复冻融；检测试剂开封后，需按照说明书要求保存，防止试剂失效。同时，使用前要对试剂进行预实验，确保其有效性。

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二、实验过程中的关键操作

（一）细胞接种与培养

细胞接种时，准确控制细胞密度至关重要。不同细胞株的最佳接种密度存在差异，可通过预实验摸索合适的接种数量。接种过程中，要保证细胞悬液充分混匀，使用多通道移液器或细胞自动接种仪均匀接种，避免因细胞分布不均导致实验误差。

→细胞培养期间，严格控制培养环境。培养箱的温度、CO₂浓度、湿度等参数需定期校准，确保细胞处于稳定的生长环境。同时，及时更换培养基，为细胞提供充足营养，防止代谢废物积累影响细胞增殖。

（二）检测方法的规范操作

不同的细胞增殖检测方法，操作要求各不相同。以 MTT 法为例，要注意 MTT 的添加时间和浓度，避免加入过多导致背景值升高；加入 MTT 后，孵育时间要严格把控，防止形成的甲臜结晶溶解。

→使用 EdU、BrdU 等 DNA 合成检测法时，要严格按照标记时间和抗体孵育条件进行操作，防止出现假阳性或假阴性结果。实验过程中，还需设置阳性对照和阴性对照，便于对结果进行准确分析。

三、实验后的结果处理与分析

（一）数据采集与记录

数据采集时，要确保仪器参数设置正确。使用酶标仪检测吸光度值，需提前校准仪器，保证数据准确性。对于显微镜观察的实验，要选取多个视野进行拍照记录，避免因视野选择偏差影响结果。

实验数据记录要详细、准确，包括实验条件、操作步骤、检测结果等信息，便于后续分析和重复实验。建议使用电子表格或专业的数据管理软件进行记录，提高数据管理效率。

（二）结果分析与误差评估

对实验结果进行分析时，要运用合适的统计方法。常见的统计分析方法包括 t 检验、方差分析等，根据实验设计选择正确的方法，避免分析错误。同时，要对实验误差进行评估，分析误差产生的原因，判断结果的可靠性。

若实验结果出现异常，不要急于下结论，需仔细回顾实验过程，排查可能存在的问题，必要时重复实验，确保结果真实可信。

细胞增殖实验的每个环节都暗藏 “玄机”，只有严格遵守上述注意事项，注重细节把控，才能保障实验顺利进行，获得可靠的实验数据。如果你在实验过程中还有其他疑问，或遇到特殊问题，欢迎在评论区留言交流：18570028002（微信同号），我们将为你提供专业的解答和指导！