免疫荧光,两个同种属抗体该怎么染??
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
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选择直标抗体:放弃传统的一抗二抗标记,使用两个直标抗体,直接染色,不需要二抗优点:操作简单方便缺点:直标抗体的灵敏度没有使用二抗高,直标抗体选择有限
自己标记抗体(标记一个即可)将其中至少一个抗体进行荧光标记,变成直标抗体。市场上有很多抗体标记试剂盒,注意试剂盒对抗体的要求
优点:比较灵活,可选抗体较多缺点:需要购买抗体标记试剂
使用特异性二抗:
此使用范围比较小,需要两个抗体分别为不同亚型,如一个为lgG1亚型,一个为lgG2b亚型,则可以分别选择抗lgG1和lgG2b的二抗优点:与常规染色方法相同,操作方便
缺点:对一抗的抗体亚型要求比较高
使用TSA多重染色
TSA多重染色,不仅可以兼容同种属抗体,还可以将信号放大
优点:如上
缺点:需要购买试剂盒,一般比较贵。
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