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Dot Blot实验方法以及操作步骤

2023-04-23 17:16:06

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

    大家好!今天普拉特泽生物继续带大家一起学习新实验——Dot Blot实验,Dot blot实验是一种快速、简便的免疫学技术,可以检测样品中目标蛋白(或其他分子)的存在和/或相对含量。普拉特泽生物病理实验平台长期为大家提供 Dot Blot实验代做外包服务,本文跟大家分享 Dot Blot实验方法以及操作步骤:

下面是Dot Blot实验的操作步骤:


    1. 制备膜:选择合适的膜,并根据实验要求进行处理,常用的有氮化纤维素(NC)膜、聚乙烯哈什表(PEI)膜等。

    2. 准备样品:将待测蛋白质稀释至更低的浓度,以减少杂交信号的产生。

    3. 准备滴点:使用微量吸管或移液器,在膜上制作滴点。

    4. 加样品:在膜上制作一系列滴点,并分别加入待测的样品、空白样品和对照样品等。

    5. 固定样品:将已加载样品的膜放置在干燥器中加热,使其彻底干燥,并将样品固定在膜上。

    6. 阻断:将阻断剂添加到膜上来防止非特异性结合,常用的阻断剂包括多肽、牛血清白蛋白等。

    7. 加第一抗体:加入与目标蛋白质特异性的第一抗体,并允许其与膜上的目标蛋白结合。

    8. 加二抗:加入与第一抗体高度特异性的二级抗体,比如HRP标记的反兔IgG等。

    9. 洗涤:通过洗涤去除非特异性结合物。

    10. 显色:在化学试剂的作用下,产生化学发光或显色信号。

以上是Dot Blot实验的基本操作步骤,需要注意的是,具体的步骤可能会因为使用不同品种的试剂和仪器而有所变化。

  (附Dot Blot实验结果图)

    好啦,Dot Blot实验方法以及操作步骤我们就简单介绍到这里啦,同学们有没有一个简单的了解呢?不懂得可以给客服留言技术给您详细解答。下一篇再详细为大家介绍Dot Blot实验结果分析报告,普拉特泽生物誓让大家透彻Dot Blot实验的检测过程。当然若果您有Dot Blot实验方法或其他医学科研实验外包的需求,欢迎随时咨询哦。