大家好！今天普拉特泽生物继续带大家一起学习新实验——甲苯胺蓝染色，甲苯胺蓝染色是病理学中常用的特殊染色，用于显示各种组织成分、细胞等。普拉特泽生物病理实验平台长期为大家提供甲苯胺蓝染色代做外包服务，本文跟大家分享动物组织样本甲苯胺蓝染色的实验步骤：

        一、甲苯胺蓝染色实验原理与准备

        甲苯胺蓝染色原理：甲苯胺蓝(Toluidine Blue)是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。

        仪器准备：生物组织摊烤片机、切片机、显微镜、盖玻片、载玻片

        试剂准备：甲苯胺蓝染色液、中性树胶、无水乙醇、二甲苯

        二、甲苯胺蓝染色实验步骤（以动物组织为例）

        1、脱蜡

        （1）70℃烤片5 min；

        （2）二甲苯（I）中脱蜡10 min；

        （3）二甲苯（II）中脱蜡10 min；

        （4）100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；

        5) 100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；

        2、水化

        （1）95%乙醇中水化1 min；

        （2）85%乙醇中水化1 min；

        （3）75%乙醇中水化1 min；

        （4）蒸馏水中水化待用；

        3、染色

        （1）甲苯胺蓝染色液染色30 min；

        （2）流水冲洗2 min；

        （3）1%盐酸酒精分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见；

        （4）流水冲洗切片5 min；

        （4）蒸馏水过洗1-2 s；

        4、脱水

        （1）85%乙醇脱水1 min；

        （2）95%乙醇脱水1 min；

        （3）无水乙醇脱水1 min；

        （4）无水乙醇脱水1 min；

        5、透明

        （1）二甲苯（I）透明2 min；

        （2）二甲苯（II）再次透明2 min；

        6、封片、镜检

        在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶，盖上盖玻片封固，显微镜下观察拍照。

        好啦，动物组织的甲苯胺蓝染色实验步骤咱们就介绍完啦，如果您也对甲苯胺蓝染色感兴趣或正在准备甲苯胺蓝染色实验的话欢迎随时咨询普拉特泽生物~