首页 > 技术文章 > 怎么区分IF/IHC/ICC?分别是什么意思

怎么区分IF/IHC/ICC?分别是什么意思

2022-02-23 11:10:51

来源/作者:普拉特泽-病理染色技术平台

     对于这IF(免疫荧光)/IHC(免疫组化)/ICC(免疫细胞化学)三个应用,有一个部分大家肯定不会混的就是“免疫”,因为这三个应用都涉及到使用抗体。首先,我们先从命名出发

       Immuno-指的是免疫技术(例如,抗体和抗原的结合)

       Histo-指的是组织(细胞以及它周围的细胞外基质)

       Cyto-指的是细胞(不包含细胞外的基质)

       Chemistry-在这里指的是化学检测方法(例如,颜色的变化)

       Fluorescence-对被激发的荧光团的检测

 

     按检测技术来分,IHC和ICC其实同属一大类,都属与将免疫沉淀技术与化学发光技术的结合,只是检测对象一个是组织,一个是细胞。从实验原理及流程都大致相同,只有前期对样本的处理有不同。IHC用的组织样本一般会做成组织切片,ICC用的细胞样本会做成细胞爬片。利用的指示剂都是化学显色剂,需要的是酶促发光。而IF则属于免疫荧光检测了,是免疫沉淀技术与荧光标记技术结合的检测技术,利用的是荧光基团来指示检测结果。靠的是仪器发送激发光来显色观察。IF的样本也是分为细胞和组织,所以更规范来说,我觉得应该将应用于组织的免疫荧光(IF)称为IHF和应用与细胞的免疫荧光技术(IF)称为ICF。它们分别意为(免疫组织荧光)Immuno histo fluorescence与Immuno cyto fluorescence(免疫细胞荧光),目前已经有些学者在使用了,普及化也只是时间的问题。毕竟从专业角度说,我通常会从一个命名去了解内容本身,命名的原则也源于此。以下通过几幅图片来具体形象的区分别一下:

   

                                                   

      IHC染色结果     

  ICC染色结果


           

      IF实验结果


此外他们的区分还在于:

     1.化学方法染色和荧光激发染色,如果是酶促的,就是免疫化学(IHC/ICC),如果是荧光的,就是免疫荧光(IF)。

  2.标本制作:免疫荧光一般用冰冻切片,减少杂质干扰;而酶免疫组化一般用石蜡切片冰冻切片均可以。


  3.实验步骤:
免疫荧光染色步骤简单,而酶免疫组化方法较为复杂,多了DAB显色过程。
 
  4.染色后的标本保存:免疫荧光染色后的标本一般短时间拍照,时间长了荧光衰退;而酶免疫组化染色标本可以长期保存。

 
  5.
免疫组化和免疫荧光结果除了知道蛋白是在细胞浆还是细胞膜表达高些,还可以用做半定量分析。

 
  6.
免疫荧光得到的图片是彩色的,漂亮些,可以发高档次文章。


     时间有限,此次就给大家总结到此。相信大家和我初次看到他们一样,想要了解更多信息,想对他们有一个清晰的认知。我一直觉得探索是永无止境的,对知识的饥饿感让我们一直在不断的前进,想要了解更多关于他们的秘密吗欢迎来我们普拉特泽春风学院学习哦,线上学习,线下实操,做你们科研的摆渡人!

                
  本文由普拉特泽生物旗下生物科研培训品牌《
春风学院》分享,春风学院提供线上视频课程培训,线下实操一对一带教,是你快速掌实验技能的好帮手