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Masson染色实验原理与步骤

2022-01-24 10:31:55

来源/作者:普拉特泽-病理染色技术平台


一、Masson染色实验简介与原理

实验简介:masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。

实验原理:Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染)或绿色(被亮绿所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染,肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。


二、Masson染色实验步骤
step1石蜡切片脱蜡至水:二甲苯Ⅰ5 min,二甲苯Ⅱ 5 min,二甲苯Ⅲ 5 min,无水乙醇 1 min,95% 乙醇 1 min,75% 乙醇 1 min,自来水冲洗数秒;

Step2:铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。

Step3:依次自来水和蒸馏水洗。

Step4:Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。

Step5:1% 盐酸酒精分化 5~15 s,充分水洗;

Step6:滴加 0.1~1% 碳酸锂 5 min,增加反蓝程度,水洗;

Step7:Masson 丽春红酸性复红液5-10min。

Step8:以2% 冰醋酸水溶液洗 1 min;

Step9:1% 磷钼酸水溶液分化 3-5 min,2% 冰醋酸水溶液洗 1 min;

Step10:不经水洗,直接用苯胺蓝水溶液或 1% 光绿水溶液染 1~2 min;以 0.2% 冰醋酸水溶液洗 1 min;

Step11: 95% 乙醇脱水 2~3 s,无水乙醇脱水 3 次每次 5 s,二甲苯透明 3 次每次 1 min、中性树胶封固。


结果:
胶原纤维或蛋白、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质和红细胞呈红色,胞核呈蓝紫色。

 

 

三、Masson染色实验注意事项

1.控制好染色步骤。

2.组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。

3.0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳。

4.磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。