今天的普拉特泽生物和大家分享生物安全柜（以下简称BSC）操作使用上的注意事项，包括：如何开关、工具如何分区摆放、运行时如何避免污染。

BSC是一种半密闭的通风设备，它为实验操作者提供洁净空气，并且洁净空气按特定方向持续吹出。

BSC内提供了一个供操作者摆放实验工具和操作的台面，当设备运行时，台面内的空间会持续获得经过过滤的洁净空气；设备不运行时，可关闭台面的玻璃门，并执行紫外照射消毒

2 分类

BSC根据防护等级可以分为I、II和III三种等级。

I级保护样品无菌，但不保护人员和环境，适用于低至中等风险的实验操作；

II级（A1/A2/B1/B2型）同时保护人员、样品和环境，适用中等至高风险操作，如病原体培养，其中A2和B型可处理挥发性有毒物质；

III级为全密闭，最高防护级别，用于高危病原体（如埃博拉病毒）。

如果我们的课题研究不涉及高风险病原微生物，那么细胞房内一般配备的是II级BSC。

从下方的II级BSC工作原理图可见，细胞房内的空气经过操作台面前端的气孔被吸入BSC内，经过内部管道流通后，到达操作台面上方的HEPA滤膜。经滤膜过滤后的空气从上至下吹送至操作台面。（见下图）

图源：NuAire | https://www.news-medical.net/whitepaper/20180320/10-Tips-to-Maximize-Protection-When-Working-in-Nuaire-Biological-Safety-Cabinet.aspx

这些吹向台面的洁净空气，当吹过样品和工具之后就不再洁净了，它们会再次被台面前端的气孔回收进入二次循环。这样，就确保了不洁净的空气不会吹出台面进而污染操作者和环境。

所以说，II级BSC能保护样品也能保护人员和环境。

3 如何开关

在每一次实验操作之前，应该先擦拭干净台面，把稍后操作要用的工具按一定规则摆放好，然后关上玻璃门，设置紫外照射30分钟，此时，人应远离BSC等待消毒结束。

消毒结束后，关闭紫外，拉起玻璃门至适当高度（通常设备会有提示限高位置，超出后无法打开风机或报警），然后开灯和打开风机。等待内部气流稳定5-10分钟后，人再坐下来操作。

实验操作结束后，清洁台面，此时仍然应该让风机继续运行5-10分钟，目的是彻底把内部空气完成过滤。

操作台面呈矩形，工具摆放时应遵循科学分区原则：1 将台面分为洁净区、操作区和污染区；2 操作区在中间位置，洁净区和污染区不相邻；3 工具应尽量均匀展开，彼此不遮挡。（见下图）

洁净区应摆放样品和一次性耗材，例如吸头、移液管、离心管、培养瓶皿。

操作区是实验操作的区域，中间位置尽量留空，靠内侧的位置可摆放移液器、试剂瓶。

污染区是存放废弃物的地方，可以把废液缸、垃圾桶放在这里，但应尽量靠内侧、靠远端放置（应确保与它们距离最近的瓶皿、设备至少相隔30厘米或以上）。

首先，正式操作时，操作者的手会多次伸入台面，并在里面移动。我们应注意：1 手臂应与台面呈垂直方向伸入；2 在内部左右移动时速度不要过快（见下图）。这样可以尽量降低手臂移动对垂直气流带来的扰动。

其次，台面上的工具会被拿来拿去，要切记：1 工具用完后不要放错区域；2 工具摆放的位置绝对不能挡住进气孔。

第二点的原因是避免工具挡住进气孔（见下图），造成污染的空气无法被回收，从而释放到实验室内，同时也会造成外部污染的空气进入BSC时不能全部被吸入进气孔，造成污染台面。

最后，是尽量避免样品、试剂被气流长时间对着直接吹。这一点可能有点难理解，我们举例说明。

例如，培养皿的盖子打开后，手应该拿着盖子挡住上方的气流，而不是直接让皿内的培养物被气流持续吹着。一方面是防止空气污染（虽然可能性很小），另一方面是避免强大的气流把培养物内可能存在的污染吹出来。同理，试剂瓶也是如此。

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文源自实验室老司机
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