动物组织番红固绿染色实验步骤由普拉特泽生物病理实验平台为大家总结分享。普拉特泽生物为广大科研人员提供长期稳定的番红固绿染色外包实验服务，本文给大家分享咱们技术长期总结下来的动物组织番红固绿组织染色实验步骤：

        一、番红固绿染色原理与实验准备

        番红固绿染色原理：改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。

        1、实验仪器准备：组织脱水仪、石蜡或冰冻包埋仪、组织切片机、组织摊片/烤片机、光学显微镜/玻片扫描仪等

        2、实验试剂准备：番红O-固绿软骨染色液、中性树胶、无水乙醇、二甲苯

        
二、番红固绿染色实验步骤（以软骨组织为例）
    1、组织样本脱蜡

        （1） 70℃烤片30 min；

        （2）二甲苯（I）中脱蜡10 min；

        （3）二甲苯（II）中脱蜡10 min；

        （4）100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；

        （5）100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；

   2、组织样本水化

        （1）95%乙醇中水化5 min；

        （2）85%乙醇中水化5 min；

        （3）75%乙醇中水化5 min；

        （4）蒸馏水中水化待用；

   3、染色

        （1）入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min；

        （2）流水冲洗2 min；

        （3） 酸性分化液分化15s；

        （4）蒸馏水洗10min；

        （5）在固绿染色液内浸染5min；

        （6）快速用弱酸溶液洗涤切片10-15s，以便去除残留的固绿；

        （7）入Saftanin O stain内浸染5min；

   4、脱水

        （1） 95%乙醇脱水2-3s；

        （2）无水乙醇脱水2-3s；

        （3） 无水乙醇脱水1 min；

   5、透明

        （1）二甲苯（I）透明2 min；

        （2）二甲苯（II）再次透明2 min；

   6、封片镜检

        （1）在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶，盖上盖玻片封固。

        （2）显微镜下拍照，或在组织扫描仪下进行玻片的全景扫描。

        好啦，动物软骨组织的番红固绿染色实验步骤咱们就讲到这里啦，如果您还有其他的问题或有番红固绿染色实验外包的需求欢迎随时咨询~