糖尿病动物造模实验步骤由普拉特泽生物技术为大家总结分享，糖尿病是由遗传因素和环境因素共同作用而导致的慢性全身性疾病，糖尿病动物模型是研究糖尿病发病机制及治疗药物的关键手段。普拉特泽生物动物实验平台长期承接糖尿病动物模型的外包代做，建立糖尿病模型上百例，总结积累了很多的实验操作经验与方法，本文就把糖尿病动物造模的方法分享给大家~

        之前的糖尿病模型的实验介绍中，我们讲到了糖尿病动物模型的构造有手术切除胰腺诱导、化学药物诱导、自发性糖尿病、饮食诱导、基因修饰等方法来诱导糖尿病动物模型，本文给大家详细讲解比较常见的手术切除胰腺诱导和药物诱导糖尿病动物模型两种方法。

        一、手术切除胰腺诱导糖尿病动物模型步骤

        胰腺切除法是最早的糖尿病动物模型复制方法(制成一型糖尿病模型)。一般选用较大的实验动物，如狗和家兔等，其次用大鼠(小鼠不适用)。

         其步骤是，切除实验动物全部或大部分胰腺，但保存胰十二指肠动脉吻合弓。如果实验动物连续两天血糖值超过11.1 mmol/L或者葡萄糖耐量试验120 min时的血糖值仍未恢复到注射前水平则认为DM造模成功。

        二、化学药物诱导糖尿病动物模型步骤

        运用化学药物损伤胰岛B细胞导致胰岛素缺乏而引起糖尿病(一型糖尿病)，常用的药物有四氧嘧啶(Alloxan)和链脲佐菌素。

        1、STZ诱发的糖尿病动物模型(目前使用最为广泛)

        造模方法：注射前用0.05mol/L柠檬酸(pH4.5)配成2%的STZ溶液，新鲜使用。大鼠糖尿病STZ的剂量为40~75mg/kg(静脉注射或腹腔注射，一定要注意回抽，严格禁止注入胃肠道)。小鼠对此药敏感性较差，常用量为100~200mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。

        评判标准：注射STZ溶液2天或者3天后，连续3天采用尿糖检测试纸检测尿糖水平，血糖水平采用葡萄糖氧化酶法检测即可，若尿糖≥3，血糖持续升高，说明注射是没问题。一周后大鼠出现三多一少症状，再次检测，若尿糖≥3，血糖≥16.67mmol/L，说明造模成功。

        2、四氧嘧啶(Alloxan)诱发糖尿病动物模型操作步骤

        四氧嘧啶(Alloxan)是一种特异的胰岛细胞毒剂，可以通过超氧自由基破坏胰岛B细胞，使得胰岛素分泌减少，它常用于制备一型糖尿病动物模型。

        造模方法：一般配成1%-3%浓度即可使用。给药剂量依动物及给药途径不同而异(均需临用前配置)，大鼠150-200 mg/kg(ip)，40-60 mg/kg(iv);小鼠200 mg/kg(ip)，85-100 mg/kg (iv)。

        评判标准：用药后2~3小时后出现初期高血糖，持续6~12小时后进入低血糖期，动物出现痉挛。注射后18h，大鼠即可出现高血糖、多尿、多饮等典型症状，血糖会升高至16.67mmol/以上，随着时间的推移，2周左右即可形成一型糖尿病模型。

        三、食物+化学诱导模型步骤（高脂高糖加链脲佐菌素诱导川型糖尿病模型）

        这种模型就是先给大鼠喂高脂高糖饲料，以诱发胰岛素抵抗，随后再腹腔注射少量的链脲佐床素(STZ)使得部分胰岛细胞遭到破坏，从而引起血糖的升高。

        8周龄的SD大鼠高热量饲喂2个月后，一次性腹腔注射15-30ma/ka剂量2%STZ溶液，可建立外周胰岛素抵抗和胰岛功能轻度受损的糖尿病动物模型，与人Ⅱ型糖尿病的发生、发展过程相似，且STZ用量小，减少了对其他组织的损害。

        高糖高脂饲料配方：66.5%普通饲料，20%蔗糖，10%猪油，2.5%胆固醇，1%胆酸盐。

        评判标准：造模3天后测定大鼠尾静脉血糖，随机血糖>16.7mmol/L视为建模成功。

        好啦，那糖尿病动物模型的造模步骤就讲完啦，虽然造模方法过程大同小异，但是操作人员的技术与经验也起到了非常重要的作用，尤其是手术和化学药物诱导糖尿病动物模型的方法，是否能构建合适的疾病模型和降低实验动物的死亡率与实验人员的手法和药物浓度的剂量都息息相关。所以如果您有糖尿病动物模型外包的需求的话，欢迎选择普拉特泽生物，随时给客服留言~