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裸鼠皮下成瘤实验常见问题处理方法

2022-05-31 16:19:56

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

        大家好!今天 普拉特泽生物 跟大家一起学习的是裸鼠皮下成瘤操作过程中容易遇到的问题和处理方法。普拉特泽生物-动物实验平台专业承接各类动物成瘤、造模实验代做,本文由技术根据多年实验经验总结而来,还不了解什么是裸鼠成瘤实验的同学可以回去了解,循序渐进的学习哦。


        皮下成瘤介绍+实验步骤

        裸鼠皮下成瘤实验操作注意事项

          那现在我们就来看看,裸鼠皮下成瘤操作中有哪些容易发生的问题和解决的方法吧!

        1、这个实验为什么用裸鼠而不用普通的老鼠或者小白鼠?

        裸鼠成瘤实验用的裸鼠,最大的特点是没有胸腺等免疫器官,它的免疫力几乎为0,对肿瘤细胞没有免疫作用,易于成瘤。

        自然状态下的老鼠和小白鼠有完整的免疫系统。免疫系统有免疫防御、免疫自稳、免疫监视三大生理功能,并通过免疫识别和免疫排斥攻击两大生理反应起作用。具有完整免疫系统的老鼠和小白鼠,会通过免疫识别反应来识别自己与非己,发现注入的肿瘤细胞这种非己抗原后,会启动免疫排斥攻击反应进行杀灭,这样肿瘤就很难形成,实验就难以进行下去。

        2、小鼠瘤子长起来又消失?

        肿瘤块先缩小,后变大很常见,很可能是炎症反应,肿瘤细胞被小鼠自身吸收,继续观察肿瘤细胞吸收之后是否经过几周还能长出来,长不起来建议换鼠。

        3、如何抓牢裸鼠?

        可以用左手拇指和食指捏紧裸鼠颈背部皮肤,小拇指夹住裸鼠尾巴,然后进行接种。

        4、是否可以在一只小鼠进行多个点荷瘤?

        不可以,一只老鼠就只能接种一个点。因为一个老鼠身上有多个肿瘤块的情况下,可能会相互影响。

        5均一性很差,肿瘤体积差距较大?

        如果荷瘤分组发现小鼠肿瘤体积差距很大,这可能跟小鼠周龄及接种细胞量不一致导致,建议重新做实验分组。

        6、肿瘤长不出来是怎么回事?

        第一:肿瘤生长周期很慢,一周开始生长肿块,大约需要1~2个月才能长成肿瘤。

        第二:可能是细胞状态差,活力不好,或是肿瘤细胞不易成瘤,需加入Matrigel辅助或增大接种量或更换细胞系;

        第三:一方面可能是小鼠周龄太大,或小鼠免疫排斥,建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠(Nod-scid小鼠,NOG小鼠>Nude裸鼠)


        7、肿瘤体积相差很大,大小不一?

        首先,不是所有的肿瘤都能够长得均一形态规则。

        其次,荷瘤分组发现小鼠肿瘤体积差距很大,这可能跟小鼠周龄及接种细胞量不一致导致,建议重新做实验分组。

        最后,一般构建肿瘤模型,裸鼠主要保证周龄,周龄小一点好。

        8是否应用免疫抑制剂加速肿瘤生长?

        如果裸鼠荷瘤不生长,可以参考文献,用免疫抑制剂如环磷酰胺(抑制裸鼠NK细胞活性)促进生长;不过最好不要为了缩短造模周期来加速生长,因为可能会造成溃烂,这样就不得不中止实验。所以一般情况下,应尽量符合细胞系本身的生长特性,不应过多地人为的干扰。

        最后,一般构建肿瘤模型,裸鼠主要保证周龄,周龄小一点好。总之,裸鼠成瘤概括来说就是,大胆的接种,勤观察,勤记录,一定要仔细记录!

        那关于裸鼠成瘤实验的所有内容我们就讲完啦,还有更多不懂得欢迎留言给客服,技术会第一时间解答的哦~我们下个实验见!