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qPCR 点样秘籍—降低孔间误差

2025-12-16 14:32:19

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

    给大家总结了一下普拉特泽生物常用qPCR加样的布板方式,可以尽可能的减少误差

    取出跑qPCR的试剂盒,冰上融化,cDNA 稀释5-10倍(具体稀释倍数大家参考说明书)


布板和体系计算

    布板:横排加同一种样品cDNA,竖排加同一种引物,这样方便加样和后续数据分析哦。

    体系:一般多计算2个孔的体系。

配置预混mix

    水、正反引物及SYBR预混,配置的时候可以先加便宜的再加贵的,能避免搞错浪费试剂

点样

    沿着竖排先加mix,将枪头伸下去一点靠管壁加入(相同的预混体系可以不换枪头);沿着横排再加cDNA,可在靠上的侧壁加样。

具体布板和点样方法,其实没有固定范式,大家有好的加样点样技巧也欢迎分享~

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